Mikrobiotesty

Microbiotests

Alternativní testy, mikrobiotesty, využívají k testování klidová stádia testovacích organismů, tj. vajíčka, cysty, ephipia, tkáně, lyofilizované a imobilizované kultury organismů. Testům se někdy říká miniaturizované testy (viz obr. 1), což je dáno minimálním množstvím objemů potřebných pro testování, minimálním požadavkem na laboratorní prostory a vybavení. Malou spotřebou testovaných roztoků umožňují provedení více paralelních testů, alternaci při vyhodnocování a v případě potřeby i opakování testu. Díky řízení produkce testovacích organismů z jejich klidových stádií (cyst a ephipií), imobilizovaných kultur řas a lyofilizovaných kultur bakterií lze provádět testy na zakázku. Líhnutí testovacích organismů a příprava kultur záleží na typu organismu, např. líhnutí vířníků z cysty probíhá maximálně 24 hodin, líhnutí korýšů trvá od 24 do 72 hodin od počátku inkubace.

Nejpoužívanějšími bateriemi testů jsou: Rototoxkit (vířník Brachionus calyciflorus (viz obr. 2)), Thamnotoxkit (korýš Thamnocephalus platyurus (viz obr. 3a–b)), Daphtoxkit (korýš Daphnia pulex (viz obr. 4), Daphnia magna (viz obr. 5)), Algaltoxkit (řasa Selenastrum capricornutum (viz obr. 6a–b), syn. Raphidocelis subcapitata).

Testy toxicity prodělaly značný rozvoj od svého zavedení do praxe až po současnost. Markantní postup ve vývoji je patrný na řasových testech toxicity od základního testu až po jeho modifikace. Tento test byl postupně modifikován nahrazením kultivačních baněk plastovými zkumavkami o objemu 2,5 ml. V Třeboni v Botanickém ústavu se vývojem modifikací zabývá J. LUKAVSKÝ, který do praxe zavedl kultivaci v sérologických destičkách očkováním řas na agar v jamkách. Agar byl později nahrazen tekutou suspenzí. Využití imobilizované kultury řas se stalo podnětem pro zavedení algaltoxkitu do praxe. Imobilizace spočívá ve vazbě živých buněk do permeabilního gelu (alginát, agar, polyakrylamid) nebo na povrch vhodného nosiče (iontoměnič, balotina). Imobilizace zastaví růst a dělení buněk, metabolická aktivita buněk pokračuje dál.

 
Obr. 1: Tzv. miniaturizovaný test akutního testu toxicity, typ Daphtoxkit.
 
Obr. 2: Druh vířníka Brachionus calyciflorus používaný v miniaturizovaných testech toxicity.
 
Obr. 3a: Druh korýše Thamnocephalus platyurus používaný v miniaturizovaných testech toxicity.
Obr. 3b: Jeden z instarů korýše Thamnocephalus platyurus.
 
Obr. 4: Druh korýše Daphnia pulex používaný v testech toxicity.
 
Obr. 5: Druh korýše Daphnia magna používaný v testech toxicity.
 
Obr. 6a: Chlorokokální řasa rodu Selenastrum používaná v testech toxicity.
Obr. 6b: Chlorokokální řasa rodu Selenastrum používaná v testech toxicity.
  Grafy souvislostí do úrovně:      I graf      II graf      III graf

Citujte jako:  ŘÍHOVÁ AMBROŽOVÁ, J. Mikrobiotesty. From Encyklopedie hydrobiologie : výkladový slovník [online]. Praha: VŠCHT Praha, 2007. Available from www: <http://vydavatelstvi.vscht.cz/knihy/uid_es-006/ebook.html?p=M018>